Aihe 2.3
Nykyaikaiset kryopreservaatiomenetelmät
Useimmat ajattelevat, että kryopreservaatio on yksinkertainen valinta: siihen joko ryhtyy tai ei. Toteutuksen laatu on kuitenkin tärkeä, eikä sitä voi arvioida ilman tietoa toiminnan käytännön edellytyksistä ja rajoituksista. Kryopreservaation käytännön rajoitukset perustuvat fysiikan ja biologian lainalaisuuksiin, eikä niitä voi kumota toiveajattelulla. Iskeeminen vaurio pahenee ajan myötä, perfuusio edellyttää kajoavaa toimenpidettä, ja kuljetus kryogeenisissä olosuhteissa voi olla hankalaa. Tavoitteena on selittää aiheen tekniset perusteet niin selkeästi, että kryopreservaatio ei jää abstraktiksi käsitteeksi, vaan siihen kuuluvat konkreettiset toimenpiteet ja niiden merkitys hahmottuvat.
Ensivaste: valmius ja stabilointiMitä tapahtuu kuoleman toteamisen jälkeen: valmius, jäähdytys, verenkierron ja hengityksen tukeminen, lääkitys, mittaukset ja siirtyminen kryoprotektiiviseen perfuusioon.Kirurginen toimenpide: perfuusio ja kryosuojausMiten verisuoniyhteyden avaaminen, veren syrjäyttäminen ja kryoprotektantin asteittainen perfuusio sovitetaan yhteen jäänmuodostuksen ehkäisyn, myrkyllisyyden, osmoottisen rasituksen ja epätasaisen jakautumisen kanssa.Byrokratia ja kuljetusTomorrow.bio ja paikalliset hautaustoimistokumppanit huolehtivat asiakirjoista, luvista ja kuljetuksesta Sveitsiin. Kun asiakirjat ovat kunnossa, maa- ja ilmakuljetus on vakiintunut menettely, eikä jäsenen tarvitse järjestää sitä itse.Biostasisin laadunvarmistusmenetelmätKryopreservaation laatu edellyttää toisiaan täydentävää näyttöä: tapauksen aikataulua, perfuusion telemetriaa, standardoitua koko kehon TT-kuvausta, elektronimikroskopiaa suostumuksella otetuista hermokudosnäytteistä, hallitun jäähdytyksen tietoja ja tarkastettavia pitkäaikaissäilytyksen tietoja.Jäähdyttäminen kryogeenisiin lämpötiloihinTomorrow.bio käyttää tietokoneohjattua jäähdytystä, useita sisäisiä lämpöantureita ja vaiheittaista protokollaa: ensin jäähdytetään nopeasti lasittumislämpötilan lähelle, sitten puretaan jännityksiä lämpökäsittelyllä ja lopuksi jäähdytetään noin 1 °C tunnissa kohti −196 °C.Näin lasiutumismenetelmät kehittyivät ajan myötäLasiutuminen kehittyi toisiinsa kytkeytyvien edistysaskelten kautta: kryoprotektantit, vaiheittainen perfuusio, jäänmuodostuksen hallinta, lämpötekniikka, elinten talteenotto, tilavuudellinen uudelleenlämmitys ja rakenteen suora mittaaminen.PitkäaikaissäilytyslaitosEBF:n Rafzin laitoksessa yhdistyvät passiivinen nestetyppisäilytys, hallittu jäähdytys, kryogeeninen tietokonetomografia, tutkimusinfrastruktuuri, erillinen potilasrahoitus, sveitsiläinen säätiöhallinto ja pitkän aikavälin toiminnan seurattavuus.Klassinen kryogeeninen säilytysjärjestelmäMiten passiivinen nestetyppisäilytys yhdistää tyhjiöeristetyt Dewar-astiat, viikoittaisen täydennyksen, jatkuvan valvonnan, kahdennetun automaattisen täytön, etävalvonnan ja ihmisten toiminnan.Moderni kryogeeninen säilytysjärjestelmä (ITS)Tomorrow.bio on saanut maailman ensimmäisen ihmiskokoisen ITS-dewarin. Sitä testataan nyt useiden kuukausien ajan lämpöteknisen suorituskyvyn, typenkulutuksen ja vikakäyttäytymisen osalta ennen potilaskäyttöä.Iskeemisen altistumisen arviointi kryoniikassa (S-MIX-mittari)Miten S-MIX muuntaa ajan, lämpötilan ja tukitoimien historian arvioiduksi normotermiseksi iskeemiseksi altistumiseksi, sekä sen laskutavan, oletukset, käyttötarkoitukset ja rajoitukset.